Primer | Primer sequences (5′–3′) |
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Disruption of poxB, pflB, ptsG, and ptsI genes | |
 ΔpoxB-attL | 5′-ACGTAACCTGTAGTTTCATCTAAGCTTGATAGCGTTATCACAAAAAGGAGATGGAAAACCTGAAGCCTGCTTTTTTATACTAAGTTGGC-3′ |
 ΔpoxB-attR | 5′-TATCACTGCGAAGATCTATCACGGCATATCCTTGTTCTGATTCAGGGTGATAGCATTGTTTACTCAGCCTTATTTTTCAGATTTTATTCGG-3′ |
 ΔpflB-attL | 5′-CATTAATGGTTGTCTCAGGCAGTAAATAAAAAATCCACTTAAGAAGGTAGGTGT TACATGTGAAGCCTGCTTTTTTATACTAAGTTGGC-3′ |
 ΔpflB-attR | 5′-AAAAAGGCCCCACTGATGTGGGGCCTTTATTGTACGCTTTTTCAGTCAGACAG GGAATTACGCTCAAGTTAGTATAAAAAAGCTGAACGA-3′ |
 ΔptsG-attL | 5′-ATGTTTAAGAATGCATTTGCTAACCTGCAGAAGGTCGGTAAATCGCTGATGCTGCCAGTATGAAGCCTGCTTTTTTATACTAAGTTGGC-3′ |
 ΔptsG-attR | 5′-TTAGCTATTGCGGATGTACTCATCCATCTCGGTTTTCAGGTTATCGGACTTGGTGCCGAACGCTCAAGTTAGTATAAAAAAGCTGAACGAG-3′ |
 ΔptsI-attL | 5′-TGAACTCGAGTAAGTTCACGGGTTCTTTTTAATATCAGTCACAAGTAAGGTAGGGTTATGTGAAGCCTGCTTTTTTATACTAAGTTGGC-3′ |
 ΔptsI-attR | 5′-ATCGAACAAACCCATGATCTTCTCCTAAGCAGTAATTTGGGCCGCGCATCTCGTGGATTACGCTCAAGTTAGTATAAAAAAGCTGAACGA-3′ |
 ΔpoxB-CF | 5′-GTCGATTAGCTTATGTAGACCG-3′ |
 ΔpoxB-CR | 5′-TGGAGTTCATTGACGGTTGGG-3′ |
 ΔpflB-CF | 5′-GGCTTTGAACACAGCATCGC-3′ |
 ΔpflB-CR | 5′-CTGTTTTGACAGGTACCC-3′ |
 ΔptsG-CF | 5′-TGAATGAAACGTGATAGCCG-3′ |
 ΔptsG-CR | 5′-TCAACTATAGACTTAGCTGC-3′ |
 ΔptsI-CF | 5′-CAAGAAGTTACCATTACCGC-3′ |
 ΔptsI-CR | 5′-TTGCCAGTAGGTTTGATGGC-3′ |
 frdABCD-CF | 5′-GCGGCGATATTACATCCTGA-3′ |
 frdABCD-CR | 5′-TCTAAGTGTAGATAGCGGCA-3′ |
A. succinogenes PCK expression cassette | |
 pck-tacR | 5′-CGAGTTTGTTTAAGTCAGTCATGGCAGTCTCCTTGTGTGAAATTGTTATCCG-3′ |
 tac-pckF | 5′-CGGATAACAATTTCACACAAGGAGACTGCCATGACTGACTTAAACAAACTCG-3′ |
 ΔpoxB-pckR | 5′-TATCACTGCGAAGATCTATCACGGCATATCCTTGTTCTGATTCAGGGTGATAGCATTGTTATCTCAGCCTTATTTTTCAGATTTTATTCGG-3′ |
Promoter replacement of frdABCD | |
 frdABCD-tacF | 5′-AAATAAAATTGATAAATTAGCGCACGGATTGATAAAAAAATCGAACGCGTTGAAGCCTGCTTTTTTATACTAAGTTGGCA-3′ |
 frdABCD-tacR | 5′-CCTGCTCCGCCTGCGCCAATGACGACAAGATCGGCTTGAAAAGTTTGCACGGCAGTCTCCTTGTGTGAAATTGTTATCCG-3′ |